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冷冻电镜样品投入冷冻技术原理,优缺点分析及适用样品类型

来源:仪器仪表网 作者:郑大 日期:2025-10-18 20:03:49
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     【仪器仪表网 专题推荐】在冷冻电镜技术中,样品冷冻质量直接决定zui终成像分辨率。投入冷冻法(Plunge Freezing)作为zui常用的冷冻固定技术,以其操作简便、成本低廉的优势,成为单颗粒分析的方法之一。本文分享:冷冻电镜样品投入冷冻技术原理,优缺点分析及适用样品类型。

冷冻电镜样品投入冷冻技术

  投入冷冻技术原理

  投入冷冻技术通过将样品载网直接投入-196℃的液态乙烷/丙烷中,实现超高速冷却,使样品中的水形成非晶态冰(玻璃态冰)而非破坏性的六方晶冰。

  关键步骤:

  样品应用:将3-5μL样品滴在电镜载网上

  滤纸吸样:用滤纸从边缘吸除多余液体,形成薄液膜

  快速投入:机械臂快速将载网投入液态乙烷中

  液氮保存:将冷冻后的样品转移至液氮中存储

  技术优缺点分析

  优势:

  ✦

  操作简单快速,单个样品仅需几分钟

  ✦

  成本低廉,无需复杂设备

  ✦

  能够完美保存表面纳米结构

  ✦

  适合大批量样品的快速制备

  局限性:

  ✦

  仅能处理<200nm超薄层样品

  ✦

  厚样品内部易形成冰晶

  ✦

  需要优化样品浓度和缓冲条件

  ✦

  对样品均匀性要求较高

  适用样品类型

  投入冷冻技术特别适合以下样品:

  ✦

  病毒颗粒(流感病毒、新冠病毒等)

  ✦

  蛋白质溶液(膜蛋白、复合体等)

  ✦

  脂质体及纳米颗粒

  ✦

  核糖体及其他大分子复合物

  ✦

  单层细胞及细胞器悬液


 
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