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噬菌体 T3 和 T7 RNA 聚合酶是 DNA 依赖性 RNA 聚合酶，对 T3 或 T7 启动子序列具有高度的序列特异性。T3 和 T7 RNA 聚合酶均可从 5’ 到 3’ 方向合成 RNA 并能结合 35S、32P 与 33P 核苷酸。这些酶是从高产重组大肠杆菌克隆中分离出来的。
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